大脑：脾是重要免疫器官，但我控制脾

为了绘制出连接脾脑的神经环路，作者使用了逆行追踪技术（retrograde tracing），该技术监测病毒编码的荧光蛋白的表达，这种病毒能在连接神经元的不同突触之间“跳跃”。由此张旭和同事就能追踪到输入脾内特定细胞的所有上游信号，并因此确认了两个关键脑区（杏仁核的中央核和下丘脑的室旁核），它们包含连接脾神经的神经元。这些区域是参与响应恐惧和受威胁等心理应激源的主要中心[7]，并且在调节神经内分泌激素的生产中起重要的作用，例如通过下丘脑-垂体-肾上腺轴的途径进行调节[8]。

这两个脑区中有一群神经细胞能释放促肾上腺皮质激素，这种激素被认为在启动人体应激反应中具有关键作用[9]。为了确定产生促肾上腺皮质激素的神经元是否影响脾脏，张旭等人利用光遗传学的方法刺激这些神经元，并通过电生理记录神经元放电，评估这是否会影响脾神经的激活。这为脑-脾连接提供了至关重要的功能性证据，因为这种刺激会增加脾神经细胞的放电。作者还报道称，抑制或去除其中任一脑区的产生促肾上腺皮质激素的神经元，均会影响抗原注射后浆细胞的形成。相反，激活神经元则能促进浆细胞形成。

虽然这些基于环路的实验方法为脑-脾轴的存在提供了关键证据，作者仍需利用能激活大脑“应激中心”的适当干预措施来检验他们的模型。然而，杏仁核中央核和下丘脑室旁核神经元的作用通路会让肾上腺在应激时分泌糖皮质激素，而糖皮质激素可能具有免疫抑制的作用